发布时间：2018-03-21 发布单位：
1目的：规范实验动物镇静剂、麻醉剂和止痛剂的使用。以及实验动物安乐死方法，确保人道的处理动物。
2范围：根据AAALAC要求，参考Laboratory Animal Anaesthesia 和AVMA Guidelines on Euthanasia推荐的动物安乐死方法制定本使用指南，为各院系PI撰写研究计划提供正确合理的镇静、麻醉和安乐死选择药物和方法。
对于给药方式说明：IP----腹腔注射 SC----皮下注射 IM----肌肉注射 IV----静脉注射 PO----口服
3设备与材料：CO2气瓶；配带盖和各种动物品种大小的麻醉诱导箱；麻醉机；注射剂或吸入剂；适当规格的注射器和针；个人防护装备至少包括防护服、手套、帽子和口罩等
4．步骤：
4.1 麻醉规程
麻醉时应认真检查所用的麻醉/止痛剂的有效使用日期，不可以使用过期的药物。
从开始麻醉到动物清醒必须对动物进行实时监护。麻醉的动物会反应迟钝、无方向感，所以麻醉时应将动物放置笼中或采取适当的措施防止动物造成损伤。动物完全麻醉（完全失去意识）方可开始手术。
麻醉期间应注意对动物采取适当的保温措施，如电热毯或红外线加热灯，防止动物体温降低。
4.2对麻醉程度的检测
如果动物有翻身反应或对疼痛和刺激发生反应，如表现蠕动、移动、收回肢体，则手术必须延迟进行。
深度疼痛测试，用手指挤压动物的后肢脚趾，如果动物有反应如缩回后肢，则动物意识未完全消失；如果动物对测试无反应，则为无意识或意识消失，麻醉达到手术要，可以开始手术。
外科手术开始时，动物应充分松弛、对疼痛刺激无反应、呼吸和心率正常。
4.3 设施
在动物房或手术室实施麻醉。但麻醉时应尽量不要在其它动物听到、看见和闻到的区域进行。
4.4局部麻醉
局麻是在小的非创伤性手术时，减轻动物痛苦而采取的措施。局麻的选择将取决于手术所需时间的长短、场所和动物品种。常用的局麻药有盐酸利多卡因和盐酸普鲁卡因。
4.5剂量计算
根据动物的体重，计算麻醉药合适的给药剂量。
例如，用氯胺酮+安定麻醉300g的大鼠
氯胺酮的剂量是75mg/kg，安定是5mg/kg
因此，0.300kg×75mg/kg=22.5mg氯胺酮
0.300kg×5mg/kg=1.5mg安定
4.6 根据动物品种选择麻醉药物、剂量和给药途径
吸入麻醉剂（如异丙烷）所有品种的动物均适用。钢瓶中压缩CO2气体与氧气（50:50）混合至100%的CO2可以用于啮齿类动物短期吸入麻醉剂。
4.7.1 CO2麻醉
CO2诱导短暂的失去意识并适用于某些实验过程，如眼眶后静脉丛采血和一些注射。每次只麻醉一只动物。
使用一个与氧气未混合的CO2相连的容器。打开气瓶的主要阀门，通过微调从而调整气体压力。把动物放进气体流动的容器并关上容器盖子。离开动物1-3/2分钟直到动物呼吸缓慢和无意识，从容器中取出动物开始实验。动物将维持20-30秒无意识状态。如果需要再麻醉20秒，追加一次麻醉剂量，不可以连续超过2次追加CO2麻醉。动物在容器中不可以放置超过5/2分钟。
动物将完全恢复，动物一恢复意识就放回原笼中。
在动物放进容器前，通过往眼里滴一滴盐酸丙对卡因更有宜于眼眶后静脉丛采血。局麻可以使动物减少对操作的敏感性并延长动物失去意识的时间，动物大约10秒钟就失去意识。先于采血前眼睛用薄纸擦拭以除去残余的盐酸丙对卡因。
4.7.2 常用的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.1小鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.1.1 小鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.04 mg/kg
SC or IP
抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定
5 mg/kg
IP
轻微镇静作用；不能止痛
氟胺酮
0.1-0.3 ml/kg
IP
轻度镇静，中度止痛；
氯胺酮
100-200 mg/kg
IM
深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用
4.7.2.1.2 小鼠麻醉药物的选择
注射用麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度(轻度/外科麻醉)
持续时间(min)
恢复时间(min)
氯胺酮﹠安定
100mg/kg﹠5mg/kg
IP
保定/麻醉
20-30
60-120
丙泊酚
26mg/kg
IV
外科麻醉
5-10
10-15
氟胺铜﹠安定
0.4ml/kg&5mg/kg
IP or IP
外科麻醉
20-40
120-240
丙泊酚
26mg/kg(然后2-2.5mg/kg/min)
IV
外科麻醉
1-12hours
10-15
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
三溴乙醇（阿弗丁)
125-240 mg/kg(使用浓度0.25%)
IP
外科麻醉
15-45
60-120
注： 100%阿佛丁（三溴乙醇+叔戊醇=1:1配成）；使用时用生理盐水进行稀释使用。
异氟烷使用需要面罩。
4.7.2.1.3小鼠止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
阿司匹林
120 mg/kg
PO
轻微止痛
-
丁丙诺啡
0.05-0.1mg/kg
SC
中等止痛
8-12 Hours
卡洛芬
5 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
美洛昔康
5 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
4.7.2.1.4 小鼠安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有小鼠
可接受方法
CO2
----
成年小鼠
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼
----
所有小鼠
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术
4.7.2.2大鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.2.1 大鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.05 mg/kg
SC or IP
抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
氟胺酮
0.2-0.5 ml/kg
IM
轻度/中度镇静，中度止痛；
安定
2.5-5 mg/kg
IP or IM
轻微镇静作用；不能止痛
氯胺酮
50-100 mg/kg
IP or IM
深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用
4.7.2.2.2 大鼠麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
氯胺酮﹠安定
75mg/kg﹠
5mg/kg
IP
轻度麻醉
20-30
120
丙泊酚
10 mg/kg
IV
外科麻醉
5
10
氟胺铜﹠
安定
0.6ml/kg﹠
2.5mg/kg
IP or IP
外科麻醉
20-40
120-240
丙泊酚
10-12mg/kg（然后0.5-1.0mg/kg/min）
IV
外科麻醉
1-12 hours
10-15
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
三溴乙醇（阿弗丁）
300 mg/kg
IP
外科麻醉
10-20
45-90
注： 100%阿佛丁（三溴乙醇+叔戊醇=1:1配成）；使用时用生理盐水进行稀释使用。
异氟烷使用需要面罩。
4.7.2.2.3大鼠止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
阿司匹林
100 mg/kg
PO
中等止痛
-
卡洛芬
5 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
美洛昔康
5 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
丁丙诺啡
0.01-0.05mg/kg
SC or IV
中等止痛
8-12 Hours
丁丙诺啡
0.1-0.25mg/kg
PO
中等止痛
8-12 Hours
4.7.2.2.4 大鼠安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有大鼠
可接受方法
CO2
----
成年大鼠
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼
----
体重＜200g
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术颈椎脱臼前需要进行麻醉处理
4.7.2.3豚鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.3.1 豚鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.05 mg/kg
SC
抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定
5 mg/kg
IP or IM
深度镇静作用
氟胺酮
1.0 ml/kg
IP or IM
中度镇静，中度止痛；
氯胺酮
100 mg/kg
IM
深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用
4.7.2.3.2 豚鼠麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
氟胺铜﹠ 安定
1.0ml/kg﹠
2.5mg/kg
IP or IM﹠IP
外科麻醉
45-60
120-180
氟胺铜﹠
安定
1.0ml/kg/h﹠
2mg/kg（每4小时）
IP ﹠IP
外科麻醉
1-12 hours
120-180
氯胺酮﹠
安定
100 mg/kg﹠
5mg/kg
IM
保定/麻醉
30-45
90-120
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
注： 异氟烷使用需要面罩。
4.7.2.3.3豚鼠止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
阿司匹林
87 mg/kg
PO
轻微止痛
-
卡洛芬
4 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
丁丙诺啡
0.01-0.05 mg/kg
SC or IP
中等止痛
大约8-12 Hours
4.7.2.3.4 豚鼠安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有豚鼠
可接受方法
CO2
----
成年豚鼠
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
4.7.2.4兔子的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.4.1 兔子镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.05 mg/kg
IM
抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定
0.5-2 mg/kg
IP or IM or IV
由轻到重度镇静；不能止痛
氟胺酮
0.2-0.5 ml/kg
IM
轻到中度镇静，轻到深度止痛；
氯胺酮
25-50 mg/kg
IM
中度缓解镇静，中度止痛；缺乏肌肉松弛作用
4.7.2.4.2 兔子麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
美索比妥
10-15mg/kg（使用浓度1%）
IV
外科麻醉
4-5
5-10
丙泊酚
10 mg/kg
IV
轻度麻醉
5-10
10-15
氟胺铜﹠
安定
0.3ml/kg﹠
1-2 mg/kg
IM ﹠ IV
外科麻醉
20-40
60-120
氟胺铜﹠
安定
0.1-0.3ml/kg/h﹠
1mg/kg（每4 小时）
IV ﹠ IV
外科麻醉
1-12 hours
60-120
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
氯胺酮﹠
安定
25 mg/kg﹠
5mg/kg
IM ﹠IM
外科麻醉
20-30
60-90
注： 异氟烷使用需要“Bain's回路”或者“Ayre's三通管”。
4.7.2.4.3兔子止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
阿司匹林
100 mg/kg
PO
轻微止痛
不清晰
卡洛芬
4 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
丁丙诺啡
0.05-0.1mg/kg
SC or IP
中等止痛
8-12 Hours
4.7.2.4.4 兔子安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有兔子
可接受方法
CO2
----
成年兔子
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼
----
体重＜1 kg
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术(颈椎脱臼前需要进行麻醉处理)
4.7.2.5犬的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.5.1 犬镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.05 mg/kg
SC or IM
抗胆碱能作用；
美托咪啶
10-100ug/kg
SC or IM or IV
轻到深度镇静；轻到中度止痛
乙酰丙嗪
0.1-0.25 mg/kg
IM
轻到中度镇静作用
氟胺酮
0.1-0.2 ml/kg
IM
中度到深度镇静，中度止痛；
4.7.2.5.2 犬麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间min
丙泊酚
5-7.5 mg/kg
IV
外科麻醉
5-10
15-30
丙泊酚
5-7.5mg/kg（然后0.2-0.4mg/kg/min）
IV
外科麻醉
20-30
15-30
丙泊酚
5-7.5mg/kg（然后0.2-0.4mg/kg/min）
IV
外科麻醉
1-12 hours
10-15
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
氯胺酮﹠美托咪啶
2.5-7.5 mg/kg﹠
40ug/kg
IM or IM
轻到中度麻醉
30-45
60-120
注： 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”。
4.7.2.5.3犬止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
卡洛芬
4 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
美洛昔康
0.2 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
丁丙诺啡
0.005-0.02 mg/kg
SC or IP
中等止痛
8-12 Hours
4.7.2.5.4 犬安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有犬
可接受方法
CO2
----
成年犬
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
氯化钾联合其他麻醉药
----
所有犬
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（心内注射氯化钾前先进行麻醉处理）
4.7.2.6小型猪的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.6.1 小型猪镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.05 mg/kg
SC or IM
抗胆碱能作用；
安定
1-2 mg/kg
IM
轻到中度镇静作用；
氯胺酮
10-15 mg/kg
IM
镇静；保定
4.7.2.6.2 小型猪麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
氯胺酮
10-15 mg/kg
IM
镇静；保定
20-30
60-120
丙泊酚
2.5-3.5 mg/kg
IV
外科麻醉
5-10
15-30
丙泊酚
2.5-3.5mg/kg（然后0.1-0.2mg/kg/min）
IV
外科麻醉
20-30
15-30
丙泊酚
2.5-3.5mg/kg（然后0.1-0.2mg/kg/min）
IV
外科麻醉
1-12 hours
10-15
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
氯胺酮﹠
安定
10-15 mg/kg﹠
0.5-2mg/kg
IM ﹠IM
保定/轻度麻醉
20-30
60-90
注： 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”或者“循环系统”。
4.7.2.6.3小型猪止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
卡洛芬
2-4 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
丁丙诺啡
0.01-0.05mg/kg
SC or IP
中等止痛
8-12 Hours
4.7.2.6.4 小型猪安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有小型猪
可接受方法
CO2
----
成年小型猪
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
氯化钾联合其他麻醉药
----
所有小型猪
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（心内注射氯化钾前先进行麻醉处理）
打击头部
----
幼龄猪周龄
条件可接受；要求技术，充分保定，和适当的力量
4.7.2.7非人灵长类的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.7.1 非人灵长类镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
阿托品
0.05 mg/kg
SC or IM
抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定
1 mg/kg
IM
轻到中度镇静
氯胺酮
5-25 mg/kg
IM
中度镇静；保定；轻微止痛；
4.7.2.7.2 非人灵长类麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
丙泊酚
7-8 mg/kg
IV
外科麻醉
5-10
10-15
氯胺酮﹠
美托咪啶
5 mg/kg﹠
0.05mg/kg
IM ﹠IM
外科麻醉
30-40
60-120
丙泊酚
7-8 mg/kg
（然后0.3-0.6mg/kg/min）
IV
外科麻醉
1-12 hours
10-15
异氟烷
0.41ml/min
at 4L/min
Fresh gas flow
(使用浓度2%)
吸入
外科麻醉
--
--
氯胺酮﹠
安定
15 mg/kg﹠
1mg/kg
IM ﹠IM
外科麻醉
30-40
60-90
注： 异氟烷使用需要“Bain's回路或者 Ayre's三通管（体重<10 kg）”
或者“MaGill回路（体重>10 kg）”。
4.7.2.7.3非人灵长类止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
氟胺铜
0.3ml /kg
IM
良好止痛
-
卡洛芬
3-4 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
美洛昔康
0.1-0.2 mg/kg
SC
中等止痛
24 Hours
丁丙诺啡
0.005-0.01
mg/kg
IM or IV
中等止痛
8-12 Hours
吗啡
1-2 mg/kg
SC or IM
中等止痛
4 Hours
4.7.2.7.4 非人灵长类安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有非人灵长类
可接受方法
吸入麻醉CO2
----
成年非人灵长类
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
4.7.2.8鸟的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.8.1 鸟镇静剂和诱导麻醉药物的选择
术前诱导麻醉药物
剂量
给药方式
效果
氯胺酮（>1 kg）
15-20 mg/kg
IM
轻微止痛；保定
氯胺酮（<1 kg）
30-40 mg/kg
IM
轻微止痛；保定
4.7.2.8.2 鸟麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
氯胺酮﹠
安定
20-40 mg/kg﹠
1-1.5mg/kg
IM ﹠IM
中等外科麻醉
20-30
30-90
4.7.2.8.3鸟止痛药物的选择
止痛剂
剂量
给药方式
效果
效果持续时间
丁丙诺啡
0.01-0.05mg/kg
IM
中等止痛
8-12 Hours
4.7.2.8.4 鸟安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
戊巴比妥钠
100-200 mg/kg
所有鸟
可接受方法
CO2
----
成年鸟
可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼
----
所有鸟
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（脱臼前进行麻醉处理）
胸部压迫
----
小到中型鸟类
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术
4.7.2.9鱼的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法
4.7.2.9.1 鱼镇镇静、麻醉、止痛和诱导麻醉药物的选择
注射用
麻醉剂
剂量
给药方式
麻醉深度（轻度/外科麻醉）
持续时间 min
恢复时间
min
MS222
25-300 mg/l
沉浸
外科麻醉
盐酸苯佐卡因
25-100 mg/l
沉浸
外科麻醉
2 分钟诱导
撤消后5分钟恢复
注：1.苯佐卡因配置：首先200 mg苯佐卡因+5 ml 丙酮，进行溶解，再加入8 L 水配置成25ppm(25mg/l)的苯佐卡因。
2.小到中型鱼（金鱼和鲑鱼），MS222 浓度为100 mg/l。
4.7.2.9.2鱼安乐死的药物和方法选择
药物或方法
剂量
试用动物
备注
MS222
≧300 mg/l
所有鱼类
可接受方法
盐酸苯佐卡因
≧100 mg/l
成年鱼类
可接受方法
脑脊髓刺毁法
----
所有鱼类
条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术
4.8 保存记录
需要所有麻醉程序的手写记录文件。记录应该包括但不仅局限于以下几点：
IACUC动物使用和管理方案编号
麻醉日期、时间和负责人签字
品系和个体或动物组别标记
使用的麻醉剂、止痛剂或镇静剂名称、剂量、给药途径和时间
如果需要在整个过程中监测生理参数（如心率、呼吸次数/节律、体温、粘膜色泽和足部的松弛度等）
4.9术后恢复
动物可与正处于恢复期的同一品系动物放在一个笼具中，也可单独放在一个饲养笼内，但不要与未麻醉的动物放在一起，防止恢复期动物受伤。动物恢复期必须保温。当动物恢复正常活动时，可以与其它动物放回同一笼或一个动物房间。随后几天必须定时对动物进行观察保证不出现并发症。